西南醫科大學附屬醫院劉靳波獲國家專利權
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龍圖騰網獲悉西南醫科大學附屬醫院申請的專利一種糖化血紅蛋白的免疫層析試紙條獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN115290905B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-08-15發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202210945898.4,技術領域涉及:G01N33/72;該發明授權一種糖化血紅蛋白的免疫層析試紙條是由劉靳波;孔鑫;李光榮;金鑫蕊設計研發完成,并于2022-08-08向國家知識產權局提交的專利申請。
本一種糖化血紅蛋白的免疫層析試紙條在說明書摘要公布了:本發明公開了一種糖化血紅蛋白的免疫層析試紙條,它是由底板、樣品墊、結合墊、反應膜和吸水紙墊組成;所述結合墊含有免疫探針;所述免疫探針為CISZnS核殼量子點熒光微球標記的HbA1c抗體。本發明糖化血紅蛋白的免疫層析試紙條,利用免疫層析技術快速、簡便的優勢耦合量子點易激發、強發光和光穩定性強的特性,通過蒸發溶脹法,并創新反應原理及合成步驟,制備新型量子點熒光微球,進一步獨創地將新型量子點熒光微球作為標記物,通過EDC法制備免疫探針。在此基礎上,構建HbA1c層析試紙條,通過對試紙條熒光信號的檢測,達到量化HbA1c的目的。
本發明授權一種糖化血紅蛋白的免疫層析試紙條在權利要求書中公布了:1.一種糖化血紅蛋白的免疫層析試紙條,其特征在于:它是由底板、樣品墊、結合墊、反應膜和吸水紙墊組成; 所述反應膜劃有T線和C線;所述T線固定有抗HbA1c單克隆抗體;所述C線固定有羊抗鼠IgG; 所述結合墊含有免疫探針;所述免疫探針為CISZnS核殼量子點熒光微球標記的HbA1c抗體; 所述CISZnS核殼量子點熒光微球標記的HbA1c抗體的制備方法為: 1核殼型量子點合成: ①取醋酸銅和正三辛基氧膦溶解于十八烯,100℃下脫氣1h,200℃下氮氣吹打5~15min,160℃下加入1-十二硫醇,溶液呈棕色后,200℃下反應100min,冷卻,用丁醇和甲醇洗滌,離心,取晶體溶解于甲苯,得原液; ②取步驟①所得原液,加甲苯稀釋3~4倍,再在吡咯烷酮羧酸鈉存在的條件下,加入InNO33·H2O甲醇溶液,17±2℃反應4天,用丁醇和甲醇洗滌,取純化的CIS量子點,加原液體積23的甲苯溶解,得CIS量子點甲苯溶液; ③取ZnSt2,加1-十八烯溶解,再加TOP-S溶液混合,得ZnS前體溶液;取步驟②所得CIS量子點甲苯溶液與1-十八烯混合,除甲苯,加熱至200℃,添加ZnS前體溶液,再200℃保持60分鐘,冷卻,加丙酮,離心,取晶體加甲苯分散,得分散液; ④取羧基鏈烷硫化物,加水和三2-甲酰乙基膦鹽酸鹽溶液混合,再加四甲基氫氧化銨至pH11.7,得MUA溶液;取步驟③所得分散液,加氯仿混合,再加MUA溶液攪拌8~12h,離心,取上清再離心,收集固體溶解于pH7的水中,得CISZnS核殼量子點溶液; 2量子點熒光微球的制備: ⑤取偶氮二異丁腈和苯乙烯混合,得混合物;取聚乙烯吡咯烷酮,加乙醇和水溶解,得混合溶液;將混合物加到混合溶液中,在密封在氮氣條件下,攪拌12~20h,取固體用乙醇清洗,離心,得線性聚苯乙烯顆粒; ⑥將步驟⑤所得線性聚苯乙烯顆粒分散到十二烷基硫酸鈉水溶液中,加入鎘液,苯乙烯、二乙烯基苯、乙酰乙酸甲酯和過氧化苯甲酰的混合物溶脹,再加入聚乙烯醇水溶液,加熱反應10~15h,取固體用乙醇洗滌,離心,最后用二氯甲烷萃取,得含有納米微球的二氯甲烷溶液; ⑦取步驟④所得CISZnS核殼量子點溶液,加甲醇氯仿溶液混勻,離心,取固體分散于氯仿中,再加入步驟⑥所得含有納米微球的二氯甲烷溶液,攪拌膨脹,再室溫下蒸發除氯仿和二氯甲烷,最后用二甲苯洗滌,離心,收集即得; 3免疫探針的制備: ⑧取步驟⑦所得量子點熒光微球,加入2-嗎啉乙磺酸MES緩沖液、1-乙基-3-二甲基氨基丙基碳二亞胺鹽酸鹽和N-羥基琥珀酰亞胺,活化20~60min,再加入抗HbA1c抗體,反應2h,離心,取沉淀,加甘氨酸混合反應1.5h,加三羥甲基氨基甲烷混合,即得。
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