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龍圖騰網(wǎng)獲悉河南中醫(yī)藥大學(xué)申請(qǐng)的專利基于PEI功能化GO和ROP雙信號(hào)放大策略的高靈敏cTnI檢測(cè)試劑盒及應(yīng)用獲國家發(fā)明授權(quán)專利權(quán)，本發(fā)明授權(quán)專利權(quán)由國家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局授予，授權(quán)公告號(hào)為：CN116539689B 。

龍圖騰網(wǎng)通過國家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局官網(wǎng)在2025-08-08發(fā)布的發(fā)明授權(quán)授權(quán)公告中獲悉：該發(fā)明授權(quán)的專利申請(qǐng)?zhí)?專利號(hào)為：202211640248.5，技術(shù)領(lǐng)域涉及：C12Q1/68；該發(fā)明授權(quán)基于PEI功能化GO和ROP雙信號(hào)放大策略的高靈敏cTnI檢測(cè)試劑盒及應(yīng)用是由程迪;張亞萍;周振波;楊懷霞;劉艷菊設(shè)計(jì)研發(fā)完成，并于2022-12-20向國家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局提交的專利申請(qǐng)。

本基于PEI功能化GO和ROP雙信號(hào)放大策略的高靈敏cTnI檢測(cè)試劑盒及應(yīng)用在說明書摘要公布了：本發(fā)明公開了基于PEI功能化GO和ROP雙信號(hào)放大策略的高靈敏cTnI檢測(cè)試劑盒及應(yīng)用，該試劑盒包括：金電極、Apt1、MCH、Apt2?GO?PEI生物偶聯(lián)物、NCA?Fc。本發(fā)明基于PEI功能化的GO和ROP雙信號(hào)放大策略，成功構(gòu)建了一種新型電化學(xué)適配體檢測(cè)試劑盒。Apt1探針通過Au?S鍵自組裝在金電極表面，通過特異性識(shí)別捕獲cTnI。Apt2?GO?PEI生物偶聯(lián)物作為ROP反應(yīng)的大分子引發(fā)劑，NCA?Fc作為ROP反應(yīng)的單體，大量的電活性聚合物鏈通過氨基引發(fā)的ROP反應(yīng)接枝到電極表面。PEI功能化的GO和NCA?Fc的聯(lián)合應(yīng)用不僅保證了反應(yīng)具有豐富的活性位點(diǎn)，而且大大提高了信號(hào)強(qiáng)度，提高了檢測(cè)的靈敏度。同時(shí)本發(fā)明具有良好的選擇性、重現(xiàn)性、穩(wěn)定性和抗干擾性。

本發(fā)明授權(quán)基于PEI功能化GO和ROP雙信號(hào)放大策略的高靈敏cTnI檢測(cè)試劑盒及應(yīng)用在權(quán)利要求書中公布了：1.基于PEI功能化GO和ROP雙信號(hào)放大策略的高靈敏cTnI的非診斷和或治療目的檢測(cè)方法，其特征在于，使用的原料包括：金電極、Apt1、MCH、Apt2-GO-PEI生物偶聯(lián)物、NCA-Fc； Apt1的序列為： 5’-SH-CH26-CGTGCAGTACGCCAACCTTTCTCATGCGCTGCCCCTCTTA-3’； Apt2-GO-PEI生物偶聯(lián)物的制備方法為： 將4mgGO-PEI分散在2mLPBS緩沖液中，然后將200μL10μMApt2溶液加入上述分散液中，在37℃下孵育3h，將產(chǎn)物離心并洗滌，最后用PBS緩沖液重新分散離心產(chǎn)物，以獲得均勻的Apt2-GO-PEI生物偶聯(lián)物； Apt2的序列為：5’-CGCATGCCAAACGTTGCCTCATAGTTCCCTCCCCGTGTCC-3’ NCA-Fc的合成方法為： （1）稱取二茂鐵甲酸溶于DCM中，0℃條件下滴加三乙胺，再依次加入HBTU和HOBT，反應(yīng)1h后，旋轉(zhuǎn)蒸干，得到產(chǎn)物Fc-OBT； （2）將TFA在0℃條件下滴入Boc-L-LysNCA的DCM溶液中，反應(yīng)1h后，移入室溫?cái)嚢柽^夜，得到NCA產(chǎn)物； （3）將三乙胺在0℃條件下滴入所制備的Fc-OBT中，然后加入所制備的NCA，室溫反應(yīng)2天，薄層色譜法監(jiān)測(cè)反應(yīng)過程，反應(yīng)結(jié)束后進(jìn)行后處理得到單體NCA-Fc； 所述檢測(cè)方法包括以下步驟： （1）金電極的修飾和ROP反應(yīng) ①將Apt1溶液滴加到金電極上，反應(yīng)，洗滌，吹干； ②將步驟①的電極浸泡在MCH溶液中，反應(yīng)，洗滌，吹干； ③將待檢測(cè)樣品滴加至步驟②的電極表面，反應(yīng)，洗滌，吹干； ④將Apt2-GO-PEI生物偶聯(lián)物溶液滴加到步驟③的電極上，反應(yīng)，洗滌，吹干； ⑤將NCA-Fc溶液滴加到步驟④的電極表面，反應(yīng)，洗滌，吹干； （2）電化學(xué)檢測(cè) 將修飾后的電極浸入LiClO4溶液中，通過方波伏安法記錄電流響應(yīng)，根據(jù)電信號(hào)大小分析cTnI含量。

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