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龍圖騰網(wǎng)獲悉貴州醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院申請(qǐng)的專(zhuān)利抑制黑色素瘤生長(zhǎng)的納米載藥系統(tǒng)的制備方法及應(yīng)用獲國(guó)家發(fā)明授權(quán)專(zhuān)利權(quán)，本發(fā)明授權(quán)專(zhuān)利權(quán)由國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局授予，授權(quán)公告號(hào)為：CN114668743B 。

龍圖騰網(wǎng)通過(guò)國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局官網(wǎng)在2025-08-08發(fā)布的發(fā)明授權(quán)授權(quán)公告中獲悉：該發(fā)明授權(quán)的專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?專(zhuān)利號(hào)為：202210273107.8，技術(shù)領(lǐng)域涉及：C12N15/113；該發(fā)明授權(quán)抑制黑色素瘤生長(zhǎng)的納米載藥系統(tǒng)的制備方法及應(yīng)用是由楊成莉;曹勇;付于銀;文志鵬;鄭志昌;李明;樊興華;白洋;李琳設(shè)計(jì)研發(fā)完成，并于2022-03-19向國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局提交的專(zhuān)利申請(qǐng)。

本抑制黑色素瘤生長(zhǎng)的納米載藥系統(tǒng)的制備方法及應(yīng)用在說(shuō)明書(shū)摘要公布了：本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，公開(kāi)了抑制黑色素瘤生長(zhǎng)的納米載藥系統(tǒng)的制備方法，包括構(gòu)建shRNA?Ptpn2質(zhì)粒、合成HA?DOX、制備M1巨噬細(xì)胞膜和制備納米載藥系統(tǒng)M1HD@RPR；還公開(kāi)了納米載藥系統(tǒng)和應(yīng)用。本發(fā)明實(shí)現(xiàn)藥物在體內(nèi)腫瘤部位的靶向遞送，用于黑色素瘤原發(fā)及肺轉(zhuǎn)移瘤抑制治療，為目前對(duì)黑色素瘤無(wú)顯著有效的治療方案的困境提供了新的攻破方向；能高效率轉(zhuǎn)染黑色素瘤細(xì)胞、具有良好的穩(wěn)定性、能自我復(fù)制、發(fā)揮高效的黑色素瘤治療率，本發(fā)明通過(guò)shRNA在細(xì)胞內(nèi)切割轉(zhuǎn)變成為siRNA，從而發(fā)揮RNAi的作用使基因沉默，利用shRNA是小干擾RNA序列作為“短發(fā)夾”克隆進(jìn)質(zhì)粒載體，使得其能在細(xì)胞內(nèi)較為穩(wěn)定的發(fā)揮RNAi作用。

本發(fā)明授權(quán)抑制黑色素瘤生長(zhǎng)的納米載藥系統(tǒng)的制備方法及應(yīng)用在權(quán)利要求書(shū)中公布了：1.抑制黑色素瘤生長(zhǎng)的納米載藥系統(tǒng)的制備方法，其特征在于，具體步驟如下： S1：構(gòu)建shRNA-Ptpn2質(zhì)粒 利用引物設(shè)計(jì)制備shRNA-Ptpn2基因，將shRNA-Ptpn2基因搭載于pGpU6GFPNeo質(zhì)粒中構(gòu)建靶向下調(diào)Ptpn2的shRNA-Ptpn2質(zhì)粒，再通過(guò)大腸桿菌擴(kuò)增shRNA-Ptpn2質(zhì)粒； S2：合成HA-DOX 將透明質(zhì)酸HA氧化后形成的芳香醛與阿霉素DOX的氨基通過(guò)亞胺鍵形成席夫堿HA-DOX，簡(jiǎn)稱(chēng)HD； S3：制備M1巨噬細(xì)胞膜 S4：制備納米載藥系統(tǒng)M1HD@RPR 將5μg步驟S1構(gòu)建的shRNA-Ptpn2質(zhì)粒與25μg細(xì)胞穿膜肽iRGD混合，靜置5min，形成iRGD與shRNA-Ptpn2的共混物iRGD-shRNA-Ptpn2，簡(jiǎn)稱(chēng)RR；向共混物RR中加入125μg聚乙烯亞胺，靜置混合5min，得聚乙烯亞胺與RR的復(fù)合物iRGD-聚乙烯亞胺-shRNA-Ptpn2，簡(jiǎn)稱(chēng)RPR；再靜置混合5min，加入含50μgDOX的HA-DOX，混勻自組裝得HD@RPR納米粒HA-DOX@iRGD-聚乙烯亞胺-shRNA-Ptpn2；之后采用微型擠出器將步驟S3中制備的M1巨噬細(xì)胞膜與HD@RPR納米粒反復(fù)過(guò)400nm聚碳酸酯膜后得M1HD@RPR納米載藥系統(tǒng)，4℃保存即可； 步驟S1中的引物包括正向引物和反向引物，正向引物的核苷酸序列見(jiàn)SEQIDNO.1，反向引物的核苷酸序列見(jiàn)SEQIDNO.2。

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