湖南農業大學劉虎虎獲國家專利權
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龍圖騰網獲悉湖南農業大學申請的專利一種通過解脂耶氏酵母體外催化合成PGF2α的方法獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN116144620B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-08-12發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202211114723.5,技術領域涉及:C12N9/08;該發明授權一種通過解脂耶氏酵母體外催化合成PGF2α的方法是由劉虎虎;何國威;范瀟;王翀;田云;盧向陽設計研發完成,并于2022-09-14向國家知識產權局提交的專利申請。
本一種通過解脂耶氏酵母體外催化合成PGF2α的方法在說明書摘要公布了:本發明公開了一種通過解脂耶氏酵母體外催化合成PGF2α(前列腺素F2α)的方法,其步驟為構建前列腺素H合成酶(PGHS)編碼基因和前列腺素F2α合酶(PGFS)編碼基因的表達模塊,通過一步組裝整合到解脂耶氏酵母基因組上,工程菌經發酵、離心,收集菌體,破碎獲得混合粗酶液;在含有血紅素和色氨酸的磷酸鹽緩沖液中加入底物花生四烯酸和混合粗酶液反應,再加入鹽酸終止反應,用乙酸乙酯萃取產物PGF2α,產量為3.828mgL。
本發明授權一種通過解脂耶氏酵母體外催化合成PGF2α的方法在權利要求書中公布了:1.一種通過解脂耶氏酵母體外催化合成PGF2α的方法,其特征在于,包括: 步驟1、構建前列腺素H合成酶(PGHS)編碼基因和前列腺素F2α合酶(PGFS)編碼基因的表達模塊,通過同源重組整合到解脂耶氏酵母基因組上,工程菌經發酵、離心,收集菌體,破碎獲得PGHS和PGFS混合酶;所述前列腺素H合成酶(PGHS)編碼基因和前列腺素F2α合酶(PGFS)編碼基因分別來源于真江蘺的前列腺素H合成酶(GvPGHS)編碼基因和來源于布氏錐蟲的前列腺素F2α合酶(TbPGFS)編碼基因;所述解脂耶氏酵母為Po1f細胞; 步驟2、在含有血紅素和色氨酸的緩沖液中加入底物花生四烯酸和混合酶,構成反應體系進行反應;所述反應體系中血紅素占比0.1%-0.3%;色氨酸占比5%-15%;混合酶占比50%-70%;底物占比1%-3%,其余為緩沖液占比15%-25%; 步驟3、完成步驟2后再向緩沖液中加入鹽酸終止反應,用乙酸乙酯萃取產物PGF2α。
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