河南中醫藥大學李一帆獲國家專利權
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龍圖騰網獲悉河南中醫藥大學申請的專利基于AgNPs和ROP信號放大策略的OTA超靈敏電化學檢測試劑盒及應用獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN116990370B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-08-15發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202310975018.2,技術領域涉及:C12Q1/68;該發明授權基于AgNPs和ROP信號放大策略的OTA超靈敏電化學檢測試劑盒及應用是由李一帆;李坤華;張晨煜;崔真真;楊懷霞;郭亮;劉艷菊設計研發完成,并于2023-08-04向國家知識產權局提交的專利申請。
本基于AgNPs和ROP信號放大策略的OTA超靈敏電化學檢測試劑盒及應用在說明書摘要公布了:本發明公開了基于AgNPs和ROP信號放大策略的OTA超靈敏電化學檢測試劑盒及應用,該試劑盒包括以下原料:金電極、Aptamer、1,6己二硫醇、AgNPs、OTA抗體?PEI溶液、NCA?Fc單體。本發明通過Au?S鍵將1,6己二硫醇修飾到金電極上,然后加入AgNPS將其修飾到HDT上,接著將一端修飾巰基的適配體與AgNPS連接,然后加入赭曲霉素A使其與適配體結合,之后加入OTA抗體?聚乙烯亞胺,與OTA特異性識別,聚乙烯亞胺上的氨基引發ROP反應,形成大量電活性探針標記的聚合物。本發明基于AgNPS和ROP信號放大策略大大提高了檢測靈敏度,且具有穩定性好以及重現性好的特點,在實際樣品的檢測中具有很大的潛力。
本發明授權基于AgNPs和ROP信號放大策略的OTA超靈敏電化學檢測試劑盒及應用在權利要求書中公布了:1.基于AgNPs和ROP信號放大策略的OTA電化學檢測試劑盒,其特征在于,包括以下原料:金電極、Aptamer、1,6己二硫醇、AgNPs、OTA抗體-PEI溶液、NCA-Fc單體; NCA-Fc單體的制備方法為: ①稱取3mmol二茂鐵甲酸溶于60mLDCM中,0℃條件下滴加6mmol三乙胺,再加入3mmolHBTU和3mmolHOBT,0℃反應1h后,旋轉蒸干溶劑DCM,得到產物Fc-OBT; ②將1230μLTFA在0℃條件下滴入叔丁氧羰基-L-賴氨酸環內酸酐溶液中,0℃反應1h后,移入室溫攪拌過夜,得到NCA產物; ③將6mmol三乙胺在0℃條件下滴入所制備的3mmolFc-OBT中,然后加入所制備的3mmolNCA,室溫反應,通過薄層色譜法監測反應過程,反應結束后,依次用飽和NaHCO3溶液、0.5M鹽酸溶液、飽和NaHCO3溶液和超純水洗滌,DCM有機相萃取,用無水Na2SO4干燥、過濾,真空干燥,得到單體NCA-Fc; 所述試劑盒檢測OTA的方法,包括以下步驟: (1)將金電極浸泡在1,6己二硫醇溶液中,反應; (2)將AgNPs溶液滴加到步驟(1)的電極上,反應; (3)將Aptamer溶液滴加到步驟(2)的電極上,反應; (4)將待檢測樣品溶液滴加到步驟(3)的電極上,反應; (5)將OTA抗體-PEI溶液滴加到步驟(4)的電極上,反應; (6)將NCA-Fc單體溶液滴加到步驟(5)的電極上,反應; (7)將步驟(6)的電極置于LiClO4溶液中測量電化學信號。
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