四川大學鄧洪新獲國家專利權
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龍圖騰網獲悉四川大學申請的專利一種共分化的血管化肝類器官及其構建方法獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN120158421B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-08-19發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202510649748.2,技術領域涉及:C12N5/071;該發明授權一種共分化的血管化肝類器官及其構建方法是由鄧洪新;張琳;柏雪;陳雙;任玉霜;魏于全設計研發完成,并于2025-05-20向國家知識產權局提交的專利申請。
本一種共分化的血管化肝類器官及其構建方法在說明書摘要公布了:本發明屬于類器官培養技術領域,具體涉及一種共分化的血管化肝類器官及其構建方法。針對現有肝類器官血管化大多采用共培養方式,操作流程復雜、細胞來源異質性較高、且具有隨機性強、均一差等問題,本發明提供了一種共分化的血管化肝類器官的構建方法,將人誘導性多能干細胞hiPSCs,依次誘導培養成定向內胚層細胞、后前腸細胞、肝內胚層細胞后,加入含VEGF的S1培養基誘導培養1?3天,再加入含VEGF、BMP4和FGF2的S2培養基誘導培養3?5天,再加入含VEGF的S3培養基誘導培養14?20天,得到共分化的血管化肝類器官。本發明方法簡化了操作流程,提高了實驗效率,獲得了具有豐富血管網絡、成熟度高、具有血管?膽管結構的肝類器官,為大規模生產和臨床應用奠定了基礎。
本發明授權一種共分化的血管化肝類器官及其構建方法在權利要求書中公布了:1.一種共分化的血管化肝類器官的構建方法,其特征在于,包括以下步驟: 將人誘導性多能干細胞hiPSCs,加入DE誘導培養基誘導培養成定向內胚層細胞,加入PGEC誘導培養基誘導培養成后前腸細胞,加入HE培養基誘導培養成肝內胚層細胞后,加入含VEGF的S1培養基誘導培養1-3天,再加入含VEGF、BMP4和FGF2的S2培養基誘導培養3-5天,再加入含VEGF的S3培養基誘導培養14-20天,得到共分化的血管化肝類器官;所述的DE誘導培養基的組成包括:RPIM1640基礎培養基中,加入終濃度為100ngmL的激活素AActivinA和3μM的Wnt激活劑ChiR99021;所述的PGEC誘導培養基的組成包括:DMEMF12基礎培養基中,加入終濃度為1%的N2、1%的B27、100UmL的青霉素-鏈霉素、2mM谷氨酰胺、15mMHepes、500ngmLFGF4和3μMChiR99021;所述的HE培養基的組成包括:RPMI-1640基礎培養基中,加入終濃度為1%的B27、100UmL的青霉素-鏈霉素、10ngmLbFGF和20ngmLBMP4;所述S1培養基的組成包括:advancedDMEMF12基礎培養基中,加入終濃度為1%谷氨酰胺、1%N2補充劑、1%B27補充劑、100UmL青霉素-鏈霉素、10nM4-羥乙基哌嗪乙磺酸緩沖液Hepes、1mMN-乙酰半胱氨酸、10nM人胃泌素I、50ngmL表皮細胞生長因子EGF、25ngmL肝細胞生長因子HGF、3μMA83-01、10mM煙酰胺、10μM毛喉素Forskolin、10-100ngmLR-脊椎蛋白R-spondin、50-100ngmL成纖維細胞生長因子10FGF10、25-100ngmlVEGF;所述S2培養基的組成包括:advancedDMEMF12基礎培養基中,加入終濃度為1%谷氨酰胺、1%N2補充劑、1%B27補充劑、100UmL青霉素-鏈霉素、10nMHepes、1mMN-乙酰半胱氨酸、10nM人胃泌素I、50ngmLEGF、25ngmLHGF、3μMA83-01、10mM煙酰胺、10μMForskolin、10-100ngmLR-spondin、50-100ngmLFGF10、25-100ngmlVEGF、10-100ngmlBMP4、10-100ngmlFGF2;所述S3培養基組成包括:advancedDMEMF12基礎培養基中,加入終濃度為1%谷氨酰胺、1%N2補充劑、1%B27補充劑、100UmL青霉素-鏈霉素、10nMHepes、1mMN-乙酰半胱氨酸、10nM人胃泌素I、50ngmLEGF、25ngmLHGF、3μMA83-01、10mM煙酰胺、10μMForskolin、10-100ngmLR-spondin、50-100ngmLFGF10、5-20ngmlVEGF。
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