中國科學(xué)院上海有機化學(xué)研究所;中國科學(xué)院上海有機化學(xué)研究所湖州生物制造創(chuàng)新中心劉文獲國家專利權(quán)
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龍圖騰網(wǎng)獲悉中國科學(xué)院上海有機化學(xué)研究所;中國科學(xué)院上海有機化學(xué)研究所湖州生物制造創(chuàng)新中心申請的專利VWB-attP和φC31-attP整合酶介導(dǎo)的基因重組方法及在鏈霉菌中應(yīng)用獲國家發(fā)明授權(quán)專利權(quán),本發(fā)明授權(quán)專利權(quán)由國家知識產(chǎn)權(quán)局授予,授權(quán)公告號為:CN113584068B 。
龍圖騰網(wǎng)通過國家知識產(chǎn)權(quán)局官網(wǎng)在2025-08-29發(fā)布的發(fā)明授權(quán)授權(quán)公告中獲悉:該發(fā)明授權(quán)的專利申請?zhí)?專利號為:202010360644.7,技術(shù)領(lǐng)域涉及:C12N15/76;該發(fā)明授權(quán)VWB-attP和φC31-attP整合酶介導(dǎo)的基因重組方法及在鏈霉菌中應(yīng)用是由劉文;張慶林;馮俊寅;潘佳明;陳單丹;王杰設(shè)計研發(fā)完成,并于2020-04-30向國家知識產(chǎn)權(quán)局提交的專利申請。
本VWB-attP和φC31-attP整合酶介導(dǎo)的基因重組方法及在鏈霉菌中應(yīng)用在說明書摘要公布了:本發(fā)明提供了一種VWB?attP和φC31?attP整合酶介導(dǎo)的基因重組方法及在鏈霉菌中應(yīng)用。具體地,本發(fā)明利用VWB?attP整合酶和φC31?attP整合酶系統(tǒng)介導(dǎo)的位點特異性整合機制將這兩種整合酶模塊構(gòu)建在同一個含有目的基因的質(zhì)粒中,通過屬間接合轉(zhuǎn)移可快速將需要表達的目的基因以多拷貝的數(shù)量重組至鏈霉菌染色體的相應(yīng)attB位點上。本發(fā)明的方法在阿維菌素,紅霉素和林可霉素產(chǎn)生菌中進行了應(yīng)用。
本發(fā)明授權(quán)VWB-attP和φC31-attP整合酶介導(dǎo)的基因重組方法及在鏈霉菌中應(yīng)用在權(quán)利要求書中公布了:1.一種利用VWB-attP整合酶介導(dǎo)的林可鏈霉菌基因重組方法,其特征在于,包括步驟: 1在林可鏈霉菌出發(fā)菌株StreptomyceslincolnensisNRRL2936的基因組CysteateNRPS基因簇中引入外源的VWB整合酶所識別的attB位點,取代該基因簇的原SLINC0744基因,所述外源的VWB整合酶所識別的attB位點序列如SEQIDNO:5所示; 其中所述林可鏈霉菌的基因組中包含選自下組的內(nèi)源的attB位點: a位于林可鏈霉菌SLINC_t29的VWB整合酶所識別的attB位點1’,其序列如SEQIDNO:5所示; b位于林可鏈霉菌SLINC_3666與SLINC_3667間隔區(qū)的VWB整合酶所識別的attB位點2’,其序列如SEQIDNO:6所示;和 c位于林可鏈霉菌SLINC_3671與SLINC_3672間隔區(qū)的VWB整合酶所識別的attB位點3’,其序列如SEQIDNO:7所示; 2將包含iVWB整合酶模塊、和ii目的基因或目的基因簇的載體引入到步驟1的林可鏈霉菌中,選擇目標(biāo)基因或目標(biāo)基因簇整合到鏈霉菌基因組內(nèi)源attB位點以及外源attB位點的鏈霉菌,從而獲得整合入多拷貝基因或基因簇的鏈霉菌, 其中,所述的內(nèi)源attB位點為位于林可鏈霉菌的VWB整合酶所識別的內(nèi)源的attB位點1’; 并且所述的目的基因簇為林可霉素生物合成基因簇。
如需購買、轉(zhuǎn)讓、實施、許可或投資類似專利技術(shù),可聯(lián)系本專利的申請人或?qū)@麢?quán)人中國科學(xué)院上海有機化學(xué)研究所;中國科學(xué)院上海有機化學(xué)研究所湖州生物制造創(chuàng)新中心,其通訊地址為:200032 上海市徐匯區(qū)零陵路345號;或者聯(lián)系龍圖騰網(wǎng)官方客服,聯(lián)系龍圖騰網(wǎng)可撥打電話0551-65771310或微信搜索“龍圖騰網(wǎng)”。
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