恰根有限公司C·瑞特獲國家專利權
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龍圖騰網獲悉恰根有限公司申請的專利富集短鏈核酸的方法獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN105018470B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-08-29發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:201510474196.2,技術領域涉及:C12N15/10;該發明授權富集短鏈核酸的方法是由C·瑞特;R·西麥爾里奇;M·韋伯設計研發完成,并于2006-12-08向國家知識產權局提交的專利申請。
本富集短鏈核酸的方法在說明書摘要公布了:本發明涉及富集長度小于300個核苷酸的核酸的方法,該方法包括以下步驟:i提供流體相,優選水相P1,其中含有α1至少一種長度小于300個核苷酸的核酸,和α2至少一種不同于所述核酸α1的組分,ii使所述相P1接觸陰離子交換基質以使所述核酸α1結合在陰離子交換基質上,iii任選用洗滌緩沖液洗滌所述陰離子交換基質,其中所述核酸α1仍舊結合于陰離子交換基質,和iv從所述陰離子交換基質上除去,優選洗脫,結合于陰離子交換基質的核酸α1以獲得含有核酸α1的流體相,優選水相P2。本發明還涉及用于富集長度小于300個核苷酸的核酸的試劑盒,涉及所述試劑盒的用途,涉及陰離子交換基質的用途,并涉及治療疾病的方法。
本發明授權富集短鏈核酸的方法在權利要求書中公布了:1.一種從血漿或血清的樣品中富集長度小于300個核苷酸的核酸的方法,所述方法包括以下步驟: i用含有0.5moll氯化鈉的裂解緩沖液裂解樣品中所含的細胞,提供流體相P1,其中含有 a1至少一種長度小于300個核苷酸的核酸a1,和 a2至少一種不同于所述核酸a1的組分, ii使所述相P1接觸陰離子交換基質以使所述核酸a1結合于陰離子交換基質上,其中所述陰離子交換基質包含選自下組的官能團:氨基、肼基和亞胺基, 其中所述陰離子交換基質以磁性顆粒上涂層的形式存在, 并且核酸a1與陰離子交換基質的結合在pH為4-6內,在存在0.05-0.75moll堿金屬鹽時進行, 其中結合所述核酸通過連續攪拌與顆粒接觸的流體相P1來進行, iii隨著磁性聚集體從所述相P1分離磁性顆粒,和用洗滌緩沖液洗滌所述陰離子交換基質,其中所述核酸a1仍舊結合于陰離子交換基質,和 iv從所述陰離子交換基質上用洗脫緩沖液洗脫結合于陰離子交換基質的核酸a1以獲得含有核酸a1的水相P2, 洗脫緩沖液含有:含1mollTrisCl,pH9.5,400mmollKCl,100mmoll硫酸銨和30mmollMgCl2,其中所述核酸a1是miRNA和tRNA的混合物; 洗脫緩沖液含有100mmollNaCl,250mmollNaCl,400mmollNaCl,100mmollKCl,250mmollKCl或400mmollKCl,其中所述核酸a1是miRNA和tRNA的混合物; 洗脫緩沖液含有10-50mmollCaCl2,其中所述核酸a1是miRNA;或 洗脫緩沖液含有25-200mmoll的氯化銨或硫酸銨,其中所述核酸a1是miRNA。
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