中南林業科技大學李澤獲國家專利權
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龍圖騰網獲悉中南林業科技大學申請的專利一種山桐子組培苗煉苗移栽的方法獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN117223606B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-08-08發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202311255811.1,技術領域涉及:A01H4/00;該發明授權一種山桐子組培苗煉苗移栽的方法是由李澤;牛長太;盧曉宇;吳玲利;唐梓萱;張榮設計研發完成,并于2023-09-27向國家知識產權局提交的專利申請。
本一種山桐子組培苗煉苗移栽的方法在說明書摘要公布了:本發明提供了一種山桐子組培苗煉苗移栽的方法,涉及植物組織培養快速繁殖技術領域。包括山桐子無菌苗的生根培養、生根后清洗培養基栽植在添加基質的透明塑料杯中,在光照培養室培養10?15d后置于大棚中,選擇傍晚或陰雨天打開瓶蓋,繼續培養10d左右,移栽在添加有有機營養土、珍珠巖、蛭石的體積比為2:1:1的基質中,移栽成活率高達96%。本發明克服了傳統組培瓶煉苗需要打開瓶蓋3?7d,移栽后成活率低的生產問題。本發明具有生根率高、煉苗移栽簡單、安全可靠、成活率高、縮短了育苗周期等特點,可開展山桐子的工廠化育苗,為山桐子的組織培養工廠化育苗提供了一條新途徑。
本發明授權一種山桐子組培苗煉苗移栽的方法在權利要求書中公布了:1.一種山桐子組培苗煉苗移栽的方法,其特征在于,包括以下步驟: 1無菌苗的選擇:截取長勢基本一致的、健壯的山桐子無菌苗為材料; 2生根培養:將步驟1中得到的無菌苗剪平胚軸基部,分別接種于MS+0.5~0.7mgLIBA、MS+1.0mgLIAA或者MS+0.3mgLIBA+0.5mgLNAA的培養基中進行生根培養; 3洗苗:將獲得的生根苗直接清洗掉根部殘余培養基,盡量保持根系完整; 4蘸苗:將生根苗的根部放入到生根粉溶液中浸蘸撈出,瀝干水分; 5移苗:將生根苗移栽到添加有基質的透明塑料杯中;在光照培養室培養10-15d后,再置于大棚中繼續培養,通過減少澆水次數適當降低基質濕度進一步馴化,保持基質含水量40-60%,繼續培養7-15d后移栽到育苗袋中,繼續在大棚中培養7-10d,在陰雨天置于搭蓋有遮陽網的圃地中; 步驟1獲得的無菌苗來自于種子萌發的無菌苗;獲取步驟包括: 1種子的預處理:將新鮮采摘的山桐子果實曬干,用砂紙打磨果實使果肉與內部種子分離開,然后將取出的種子清水浸泡沖洗干凈后置于通風處陰干;陰干后的種子在接種前用洗衣粉清洗去除表面蠟質; 2外植體篩選:將山桐子種子置于30-40℃溫水中浸泡處理,然后將漂浮在水面的種子清除,重復此操作至少2次;然后將種子在蒸餾水浸泡,靜置至少24h后,將漂浮在水面的種子清除; 3外植體消毒:在無菌條件下,將山桐子種子用0.1%HgCl2溶液中浸泡10min,浸泡過程中要不時搖動,保證HgCl2對種子的充分消毒,最后用無菌水沖洗3-5次; 4種子初代培養:將消毒好的種子置于無菌濾紙上吸干水分,然后將種子接種到12MS+1.0mgLGA3+1.0-3.0gL活性炭或者12MS+2.0mgLGA3+1.0-3.0gL活性炭的培養基中;培養基附加蔗糖30gL,瓊脂8gL,pH調至5.7-5.9;光照條件下培養40-50d作為生根苗的原始材料,培養溫度為26±2℃,光照培養強度為1600-1800lx,光照培養時間12-14hd; 或者步驟1獲得的無菌苗來自于帶芽莖段誘導的無菌苗;獲取步驟包括: 1山桐子帶芽莖段的獲取:試驗材料來自于山桐子盆栽苗,采用4、5月份萌發的嫩枝或半木質化帶芽莖段作為外植體材料; 2外植體預處理:將山桐子盆栽苗側枝自基部剪下,置于流水中沖洗30-40min;然后將側枝的上半部分嫩枝或半木質化莖段切成3-4cm長的莖段,每個莖段留有1-2個腋芽,用洗潔精清洗1-2次,用軟毛刷清理莖段殘留雜質,再置于流水下沖洗至少1h; 3外植體消毒:在無菌條件下,將山桐子帶芽莖段用75%酒精消毒1min,浸泡過程中要不時搖動,保證酒精對帶芽莖段的充分消毒,1min后換新的75%酒精再次浸泡1min,無菌水沖洗3-5次,再用0.1%HgCl2溶液對嫩枝消毒25或35min、半木質化莖段消毒50min,浸泡過程中要不時搖動,保證升汞溶液對帶芽莖段的充分消毒,最后用無菌水沖洗3-5次; 4帶芽莖段的初代培養:將消毒好的帶芽莖段置于無菌濾紙上吸干水分;用無菌刀切除莖段頂部以及尾部褐化部分,然后將帶芽莖段接種到 12MS+1.0-2.0mgL6-BA+0.5-1.0mgLNAA的培養基中培養;培養基附加蔗糖30gL,瓊脂8gL,pH調至5.5-5.7;光照條件下進行培養30-40d,培養溫度為26±2℃,光照培養強度為1600-1800lx,光照培養時間12-14hd; 步驟5中移栽基質為有機營養土、珍珠巖、蛭石按2:1:1的體積比混合,將山桐子生根苗栽植于帶蓋的透明塑料杯中,每杯1~3株,蓋好蓋子,蓋子和距下底0.5-1cm高度的側面各開一直徑3-6mm小孔,保持基質含水量70%以上,在光照培養室培養10-15d后,光照強度為1600-1800lx,光照培養溫度為26±2℃,光照時間為12hd,再置于大棚中繼續培養,溫度為20-35℃,通過減少澆水次數適當降低基質濕度進一步馴化,保持基質含水量40-60%,繼續培養7-15d后移栽到添加有有機營養土、珍珠巖、蛭石的體積比為2:1:1的育苗袋中,繼續在大棚中培養7-10d,在陰雨天置于搭蓋有遮陽網的圃地中; 步驟5中透明塑料杯的規格為:下底直徑8cm,高14.5cm,瓶口直徑11.5cm,移栽基質體積為透明塑料杯容積的15。
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