中南大學湘雅醫(yī)院呂紅斌獲國家專利權
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龍圖騰網(wǎng)獲悉中南大學湘雅醫(yī)院申請的專利一種細胞外基質高保留的脫細胞半月板及其制備方法獲國家發(fā)明授權專利權,本發(fā)明授權專利權由國家知識產(chǎn)權局授予,授權公告號為:CN116870255B 。
龍圖騰網(wǎng)通過國家知識產(chǎn)權局官網(wǎng)在2025-08-08發(fā)布的發(fā)明授權授權公告中獲悉:該發(fā)明授權的專利申請?zhí)?專利號為:202310958635.1,技術領域涉及:A61L27/36;該發(fā)明授權一種細胞外基質高保留的脫細胞半月板及其制備方法是由呂紅斌;章濤;石新;胡建中設計研發(fā)完成,并于2023-08-01向國家知識產(chǎn)權局提交的專利申請。
本一種細胞外基質高保留的脫細胞半月板及其制備方法在說明書摘要公布了:本發(fā)明公開了一種細胞外基質高保留的脫細胞半月板及其制備方法。該方法包括下述步驟:1將生物材料進行凍融循環(huán);2將步驟1中的經(jīng)凍融循環(huán)處理后的生物材料取出依次經(jīng)細胞洗脫液:A液、B液、C液、D液直至生物材料脫細胞結束;其中用A液、B液、C液、D液進行洗脫時,所述生物材料固定于容器內進行;其中,A液為TritonX?100溶液;B液、D液為PBS;C液為脫氧核糖核酸酶I和核糖核酸酶A組成的核酸酶溶液;細胞洗脫液中不含有胰蛋白酶;A液洗脫時間為7天。本發(fā)明的脫細胞方法能夠在完全去除細胞成分的同時,盡可能地保留半月板細胞外基質成分,為細胞生長提供原生態(tài)微環(huán)境。
本發(fā)明授權一種細胞外基質高保留的脫細胞半月板及其制備方法在權利要求書中公布了:1.一種細胞外基質高保留的脫細胞半月板制備方法,其特征在于,其包括下述步驟: 1將生物材料進行凍融循環(huán); 在所述凍融循環(huán)之前,所述生物材料用磷酸鹽緩沖液清洗; 所述凍融循環(huán)次數(shù)為3-5次,其中,單次循環(huán)的條件為:液氮冷凍4-8分鐘,30-40℃水浴解凍8-15分鐘; 2將步驟1中的經(jīng)凍融循環(huán)處理后的生物材料取出依次經(jīng)細胞洗脫液:A液、B液、C液、D液直至生物材料脫細胞結束;其中用A液、B液、C液、D液進行洗脫時,所述生物材料固定于容器內進行; 其中,所述A液為含有1%青霉素-鏈霉素的0.1%TritonX-100溶液;所述B液、D液為無菌1%青霉素-鏈霉素的PBS;所述C液為含有300UImL脫氧核糖核酸酶I和500μgmL核糖核酸酶A組成的核酸酶溶液; 所述A液洗脫的條件為在4℃下于搖床上80rpmmin連續(xù)攪拌; 所述B液洗脫的條件為在4℃下于搖床上150rpmmin攪拌洗滌3次,每次2小時; 所述C液洗脫的條件為置于37℃恒溫搖床中100rpmmin孵育24小時; 所述D液洗脫的條件為利用無菌1%青霉素-鏈霉素的PBS沖洗3次,每次6小時; 所述細胞洗脫液中不含有胰蛋白酶; 當所述經(jīng)凍融循環(huán)處理后的生物材料經(jīng)A液洗脫時,洗脫時間為7天。
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