廈門大學(xué);嘉庚創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)室張惠敏獲國(guó)家專利權(quán)
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龍圖騰網(wǎng)獲悉廈門大學(xué);嘉庚創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)室申請(qǐng)的專利一種基于數(shù)字微流控技術(shù)的單細(xì)菌基因組測(cè)序方法獲國(guó)家發(fā)明授權(quán)專利權(quán),本發(fā)明授權(quán)專利權(quán)由國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局授予,授權(quán)公告號(hào)為:CN115197840B 。
龍圖騰網(wǎng)通過國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局官網(wǎng)在2025-08-08發(fā)布的發(fā)明授權(quán)授權(quán)公告中獲悉:該發(fā)明授權(quán)的專利申請(qǐng)?zhí)?專利號(hào)為:202210987383.0,技術(shù)領(lǐng)域涉及:C12M1/42;該發(fā)明授權(quán)一種基于數(shù)字微流控技術(shù)的單細(xì)菌基因組測(cè)序方法是由張惠敏;郭俊南;楊朝勇;朱志設(shè)計(jì)研發(fā)完成,并于2022-08-17向國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局提交的專利申請(qǐng)。
本一種基于數(shù)字微流控技術(shù)的單細(xì)菌基因組測(cè)序方法在說明書摘要公布了:本發(fā)明涉及單細(xì)菌測(cè)序領(lǐng)域,具體涉及一種基于數(shù)字微流控技術(shù)的單細(xì)菌基因組測(cè)序方法。本發(fā)明開發(fā)了基于全自動(dòng)數(shù)字微流控平臺(tái)DMF的適用于單細(xì)菌的微型裂解體系、數(shù)字微流控芯片及單細(xì)菌基因組測(cè)序技術(shù),實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,裂解體系單細(xì)菌細(xì)胞裂解迅速、基因完整度好、組裝效率及基因覆蓋度高;同時(shí)該裂解體系及基于該裂解體系的微流控芯片與DMF的聯(lián)用,減少了試劑的損耗,降低了樣品污染風(fēng)險(xiǎn)、提高了反應(yīng)效率、減小了擴(kuò)增偏差,使之更適用于單細(xì)菌基因組測(cè)序。
本發(fā)明授權(quán)一種基于數(shù)字微流控技術(shù)的單細(xì)菌基因組測(cè)序方法在權(quán)利要求書中公布了:1.數(shù)字微流控芯片,其特征在于,包括細(xì)菌捕獲及裂解單元、液滴生成通道、儲(chǔ)液池單元和電極接口;所述儲(chǔ)液池單元的數(shù)量不低于5個(gè),分別存儲(chǔ)有裂解試劑A、裂解試劑B、中和液、擴(kuò)增試劑和菌液;其中, 裂解試劑A為:800~2400UμL溶菌酶、400~1200mM二硫蘇糖醇和2~6mM乙二胺四乙酸; 裂解試劑B為:300~500mMKOH、80~120mM二硫蘇糖醇和5~15mM乙二胺四乙酸; 中和液為:0.8~1.2MTris-HCl溶液; 擴(kuò)增試劑為:隨機(jī)引物、DNA聚合酶、dNTP、擴(kuò)增緩沖液和二硫蘇糖醇; 還包括:熒光染料、填充油和純化試劑;所述熒光染料為FM1-43;所述填充油選自礦物油、氟油、硅烷油、二甲基硅油;所述純化試劑選自柱純化試劑或磁珠純化試劑; 所述細(xì)菌捕獲及裂解單元包括:上極板基底,設(shè)置在所述上極板基底下表面的ITO涂層,設(shè)置于所述ITO涂層下表面的上疏水層;下極板基底,設(shè)置于所述下極板基底上表面的介質(zhì)層,嵌設(shè)于所述介質(zhì)層內(nèi)的電極,設(shè)置在所述介質(zhì)層上表面的下疏水層,支撐于所述下疏水層和所述上疏水層之間的支撐體,所述上疏水層、所述下疏水層和所述支撐體之間形成液滴生成通道,所述下疏水層嵌設(shè)有親水凹槽,所述親水凹槽的上槽口與所述液滴生成通道相通;所述液滴生成通道的通口與所儲(chǔ)液池單元連通;所述電極接口與所述電極相連接,所述親水凹槽為中空的圓柱形結(jié)構(gòu),直徑為150~300μm,與每個(gè)儲(chǔ)液池皆有2個(gè)電極以上的距離。
如需購(gòu)買、轉(zhuǎn)讓、實(shí)施、許可或投資類似專利技術(shù),可聯(lián)系本專利的申請(qǐng)人或?qū)@麢?quán)人廈門大學(xué);嘉庚創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)室,其通訊地址為:361003 福建省廈門市思明南路422號(hào);或者聯(lián)系龍圖騰網(wǎng)官方客服,聯(lián)系龍圖騰網(wǎng)可撥打電話0551-65771310或微信搜索“龍圖騰網(wǎng)”。
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