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龍圖騰網獲悉北京大學人民醫院申請的專利一種新型環狀RNA成環序列構建CAR-T細胞及在治療小細胞肺癌中的應用獲國家發明授權專利權，本發明授權專利權由國家知識產權局授予，授權公告號為：CN116411023B 。

龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-08-12發布的發明授權授權公告中獲悉：該發明授權的專利申請號/專利號為：202310162751.2，技術領域涉及：C12N15/85；該發明授權一種新型環狀RNA成環序列構建CAR-T細胞及在治療小細胞肺癌中的應用是由邱滿堂;蔡景升;劉政;李浩然設計研發完成，并于2023-02-24向國家知識產權局提交的專利申請。

本一種新型環狀RNA成環序列構建CAR-T細胞及在治療小細胞肺癌中的應用在說明書摘要公布了：本發明公開了新型環狀RNA成環序列構建CAR?T細胞及在治療小細胞肺癌中的應用。本發明提供了一種制備DLL3?CAR?T細胞的方法，包括如下步驟：1制備DLL3?CAR結構環狀RNA；2將所述DLL3環狀RNA包載在脂質材料中，得到包載DLL3circRNA的LNP；3將所述包載DLL3circRNA的LNP轉染到T細胞中，得到DLL3?CAR?T細胞。本發明實驗證明，本發明提供了一種新型RNA成環序列及其構建CAR?T細胞的制備方法，利用該方法構建靶向DLL3靶點的CAR?T，有望為SCLC治療提供一種創新、有效的治療技術，為CAR?T應用于腫瘤治療帶來革命性的突破。

本發明授權一種新型環狀RNA成環序列構建CAR-T細胞及在治療小細胞肺癌中的應用在權利要求書中公布了：1.一種制備靶向DLL3靶點的CAR-T細胞的方法，包括如下步驟： 1）制備靶向DLL3CAR結構的環狀RNA，記作DLL3circRNA； 所述DLL3circRNA按照如下方法制備： 1）-1、制備表達DLL3circRNA的質粒，該質粒含有DLL3-CAR結構編碼序列的I型內含子核酶序列骨架片段； 所述DLL3-CAR結構編碼序列的I型內含子核酶序列骨架片段依次包括：5’同源臂、魚腥藻T4內含子3’端、CVB3_IRES_1、DLL3-CAR結構編碼序列、CVB3_IRES_2、魚腥藻T4內含子5’端和3’同源臂； 所述CVB3_IRES_1的核苷酸序列為序列2第185-934位； 所述CVB3_IRES_2的核苷酸序列為序列2第2528-2570位； 1）-2、將所述表達DLL3circRNA的質粒線性化，得到線性化質粒； 所述線性化采用酶的酶切位點存在于所述質粒中DLL3-CAR結構編碼序列的I型內含子核酶序列骨架片段除外的區域； 1）-3、從所述線性化質粒中擴增所述DLL3-CAR結構編碼序列的I型內含子核酶序列骨架片段，得到I型內含子核酶序列骨架片段擴增產物； 1）-4、體外轉錄所述I型內含子核酶序列骨架片段擴增產物，得到轉錄產物； 1）-5、向所述轉錄產物中添加GTP孵育，實現環化，得到DLL3circRNA； 2）將所述DLL3circRNA包載在脂質材料中，得到包載DLL3circRNA的LNP； 3）將所述包載DLL3circRNA的LNP轉染到T細胞中，得到DLL3-CAR-T細胞，即為靶向DLL3靶點的CAR-T細胞； 所述DLL3-CAR結構編碼序列的I型內含子核酶序列骨架片段中的5’同源臂上游還包括轉錄啟動子； 或，所述5’同源臂的核苷酸序列為序列2第24-53位； 或，所述魚腥藻T4內含子3’端的核苷酸序列為序列2第54-184位； 或，所述DLL3-CAR結構編碼序列的核苷酸序列為序列2第935-2527位； 或，所述魚腥藻T4內含子5’端的核苷酸序列為序列2第2571-2686位； 或，所述3’同源臂的核苷酸序列為序列2第2687-2721位； 或，所述轉錄啟動子為T7啟動子； 或，所述T7啟動子的核苷酸序列為序列2第1-23位； 所述DLL3-CAR結構編碼序列的I型內含子核酶序列骨架片段的核苷酸序列為序列2。

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