南京工業大學陳勇獲國家專利權
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龍圖騰網獲悉南京工業大學申請的專利異源表達cspB基因生物成膜固定化發酵產賴氨酸的重組谷氨酸棒桿菌獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN116064341B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-08-12發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202210819917.9,技術領域涉及:C12N1/21;該發明授權異源表達cspB基因生物成膜固定化發酵產賴氨酸的重組谷氨酸棒桿菌是由陳勇;劉偉;應漢杰;陳天鵬;孫文俊;余斌設計研發完成,并于2022-07-13向國家知識產權局提交的專利申請。
本異源表達cspB基因生物成膜固定化發酵產賴氨酸的重組谷氨酸棒桿菌在說明書摘要公布了:本發明公開了異源表達cspB基因生物成膜固定化發酵產賴氨酸的重組谷氨酸棒桿菌;所述重組谷氨酸棒桿菌的構建方法,包括以下步驟:1擴增目的基因cspB;2將目的基因cspB克隆到質粒pXMJ19的XbaI酶與Kpnl酶的兩個酶切位點之間,得到重組質粒pXMJ19?cspB;3將重組質粒pXMJ19?cspB轉化到大腸桿菌DH5α感受態中,篩選得含重組質粒pXMJ19?cspB的大腸桿菌,再提取重組質粒pXMJ19?cspB;4將提取得到的重組質粒轉化到谷氨酸棒桿菌感受態中。本發明將生物膜和固定化發酵技術相結合,同時縮短了發酵周期、實現了細胞的可循環使用,節約了成本。
本發明授權異源表達cspB基因生物成膜固定化發酵產賴氨酸的重組谷氨酸棒桿菌在權利要求書中公布了:1.一株重組谷氨酸棒桿菌在固定化發酵產賴氨酸中的應用,其特征在于,所述重組谷氨酸棒桿菌為在原始谷氨酸棒桿菌ATCC13032中異源表達核苷酸序列如SEQIDNO.1所示的cspB基因; 所述重組谷氨酸棒桿菌的構建方法,包括以下步驟: 1擴增目的基因cspB; 2將步驟1得到的目的基因cspB克隆到質粒pXMJ19的XbaI酶與Kpnl酶的兩個酶切位點之間,得到重組質粒pXMJ19-cspB; 3將步驟2所得重組質粒pXMJ19-cspB轉化到大腸桿菌DH5α感受態中,篩選得含重組質粒pXMJ19-cspB的大腸桿菌,再提取重組質粒pXMJ19-cspB; 4將步驟3提取得到的重組質粒轉化到谷氨酸棒桿菌感受態中,即得到重組谷氨酸棒桿菌; 發酵培養基的組成為70%糖118-138mLL、硫酸銨35-55gL、硫酸鎂0.2-2.2gL、糖蜜5-25mLL、玉米漿5-25mLL、磷酸二氫鉀0.1-2.1gL、硫酸亞鐵150-250mgL、硫酸錳100-200mgL、煙酰胺50-70mgL、泛酸鈣5-15mgL、VB15-15mgL、硫酸銅0.5-1.5mgL、硫酸鋅0.5-1.5mgL、生物素0.8-2.8mgL、碳酸鈣20-40gL。
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