杭州紐龍生物科技有限公司邵馮金獲國家專利權
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龍圖騰網獲悉杭州紐龍生物科技有限公司申請的專利一種基于大腸桿菌載體的重組人乳鐵蛋白的制備方法獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN120271696B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-08-19發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202510771770.4,技術領域涉及:C07K14/79;該發明授權一種基于大腸桿菌載體的重組人乳鐵蛋白的制備方法是由邵馮金;高振飛;厲東方;錢永常;來燦鋼設計研發完成,并于2025-06-11向國家知識產權局提交的專利申請。
本一種基于大腸桿菌載體的重組人乳鐵蛋白的制備方法在說明書摘要公布了:本發明公開了一種基于大腸桿菌載體的重組人乳鐵蛋白的制備方法,包括以下步驟:(1)將人乳鐵蛋白的C葉片段基因序列插入至pET28a質粒中形成重組質粒pET28a?rhLF;(2)以重組質粒pET28a?rhLF為模板,擴增獲得改造后的目的基因;(3)以質粒pET28g為模板,擴增獲得改造后的載體;(4)將改造后的目的基因與改造后的載體進行重組連接,轉入DH5α中獲得重組質粒;(5)轉入大腸桿菌BL21中獲得大腸桿菌工程菌株;(6)發酵培養,誘導表達重組人乳鐵蛋白。本發明能夠在大腸桿菌表達系統中的高效表達具有生物活性的重組人乳鐵蛋白,成本低,產量高,適合工業化生產。
本發明授權一種基于大腸桿菌載體的重組人乳鐵蛋白的制備方法在權利要求書中公布了:1.一種基于大腸桿菌載體的重組人乳鐵蛋白的制備方法,其特征在于,包括以下步驟: (1)以SEQIDNO:1所示的重組人乳鐵蛋白為目標進行重組表達,將重組人乳鐵蛋白的基因序列插入至pET28a質粒中形成重組質粒pET28a-rhLF; (2)以重組質粒pET28a-rhLF為模板,設計第一改造引物進行PCR,獲得改造后的目的基因; (3)以質粒pET28g為模板,設計第二改造引物進行PCR,獲得改造后的載體; (4)將步驟(2)得到的改造后的目的基因與步驟(3)得到的改造后的載體進行重組連接,將重組連接產物轉入DH5α中,培養,提取,獲得重組質粒; (5)將重組質粒轉入大腸桿菌BL21中獲得高效表達重組人乳鐵蛋白的大腸桿菌工程菌株; (6)將高效表達重組人乳鐵蛋白的大腸桿菌工程菌株進行發酵培養,誘導表達重組人乳鐵蛋白;表達產物經純化后,獲得重組人乳鐵蛋白;重組人乳鐵蛋白的氨基酸序列見SEQIDNO:1所示。
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