中國食品藥品檢定研究院;中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院范昌發獲國家專利權
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龍圖騰網獲悉中國食品藥品檢定研究院;中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院申請的專利人ACE2基因敲入的小鼠模型、其產生方法和用途獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN115968404B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-08-19發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202180029577.3,技術領域涉及:C12N15/89;該發明授權人ACE2基因敲入的小鼠模型、其產生方法和用途是由范昌發;秦成峰;王佑春;周育森設計研發完成,并于2021-04-23向國家知識產權局提交的專利申請。
本人ACE2基因敲入的小鼠模型、其產生方法和用途在說明書摘要公布了:提供了基因組中敲入了人ACE2基因的小鼠、其產生方法和其在用于評估抗SARS?CoV?2的抗病毒劑和疫苗的體內功效中的用途。將人ACE2準確插入到小鼠基因組中mACE2基因處,建立了在mACE2基因處人ACE2基因的新型敲入小鼠模型。
本發明授權人ACE2基因敲入的小鼠模型、其產生方法和用途在權利要求書中公布了:1.一種構建破壞了mACE2功能的、hACE2基因敲入小鼠模型的方法,所述方法包括: a在小鼠基因組中mACE2基因處定點插入hACE2基因; b獲得在小鼠基因組中mACE2基因處hACE2基因純合的或雜合的F1子代小鼠;和c獲得b中小鼠的后代, 其中所述小鼠基因組中mACE2基因處為mACE2基因的外顯子2處, 其中所述步驟a包括: i向小鼠的合子中引入CRISPRCas9系統和供體DNA,其中所述CRISPRCas9系統能夠在所述小鼠基因組小鼠mACE2基因的外顯子2處的靶位點處引入雙鏈斷裂,所述供體DNA包含hACE2基因; ii將獲自i的各合子分別導入代孕鼠中妊娠,由代孕鼠產下后代; iii將代孕鼠產下的后代中經鑒定為hACE2陽性的小鼠作為首建鼠,并將首建鼠與合子的來源背景鼠品系交配繁育,獲得hACE2陽性的F1子代,為hACE2基因純合的或雜合的小鼠,也稱為F1子代陽性小鼠; 其中向小鼠的合子中引入的供體DNA是包含hACE2基因的打靶載體,其中所述打靶載體包含5’同源臂、hACE2基因、內部核糖體進入位點IRES序列、報告基因、土撥鼠肝炎病毒轉錄后調節元件WPRE、多聚A序列、3’同源臂;其中所述同源臂是與該小鼠mACE2基因的外顯子2處的基因組序列同源的序列, 其中所述CRISPRCas9系統包含切割作為靶DNA的小鼠mACE2基因的外顯子2處DNA的組合物,其包含特異于靶DNA的單一向導RNA或編碼單一向導RNA的DNA、和Cas蛋白質編碼核酸或Cas蛋白質的組合物,其中所述單一向導RNA由GAAAGATGTCCAGCTCCTCCTGG所示的核苷酸序列組成,且所述Cas蛋白質由SEQIDNO:6所示的氨基酸序列組成。
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