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龍圖騰網(wǎng)獲悉中國(guó)科學(xué)院天津工業(yè)生物技術(shù)研究所申請(qǐng)的專利一種基于流式細(xì)胞術(shù)的免涂板操作的菌株工程改造的方法及應(yīng)用獲國(guó)家發(fā)明授權(quán)專利權(quán)，本發(fā)明授權(quán)專利權(quán)由國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局授予，授權(quán)公告號(hào)為：CN116135979B 。

龍圖騰網(wǎng)通過(guò)國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局官網(wǎng)在2025-08-29發(fā)布的發(fā)明授權(quán)授權(quán)公告中獲悉：該發(fā)明授權(quán)的專利申請(qǐng)?zhí)?專利號(hào)為：202111352181.0，技術(shù)領(lǐng)域涉及：C12N15/80；該發(fā)明授權(quán)一種基于流式細(xì)胞術(shù)的免涂板操作的菌株工程改造的方法及應(yīng)用是由田朝光;王興吉;劉倩;楊玉凈;劉音;劉丹丹;郭文柱;孫濤;孫文良設(shè)計(jì)研發(fā)完成，并于2021-11-16向國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局提交的專利申請(qǐng)。

本一種基于流式細(xì)胞術(shù)的免涂板操作的菌株工程改造的方法及應(yīng)用在說(shuō)明書摘要公布了：本發(fā)明構(gòu)建了一種基于流式細(xì)胞術(shù)的免平板操作的菌株工程改造的方法，將將帶有選擇性標(biāo)記基因的DNA序列的轉(zhuǎn)化進(jìn)入目的真菌原生質(zhì)體基因組中、流式細(xì)胞儀分選、深孔板培養(yǎng)、以及表型快速分析步驟結(jié)合起來(lái)。可直接用于絲狀真菌遺傳轉(zhuǎn)化后的原生質(zhì)體的篩選和分離，解決了現(xiàn)有絲狀真菌技術(shù)中鋪平板培養(yǎng)、轉(zhuǎn)化子挑選、分生孢子制備以及搖瓶鑒定過(guò)程中耗時(shí)長(zhǎng)、費(fèi)力、通量低的瓶頸問(wèn)題。本發(fā)明的方法操作方便、省時(shí)省力，極大提高絲狀真菌工程改造的效率，可便捷有效的進(jìn)行高通量構(gòu)建絲狀真菌高產(chǎn)工程菌。

本發(fā)明授權(quán)一種基于流式細(xì)胞術(shù)的免涂板操作的菌株工程改造的方法及應(yīng)用在權(quán)利要求書中公布了：1.一種基于流式細(xì)胞術(shù)的免平板操作的絲狀真菌工程改造的方法，其特征在于，包括如下步驟： （1）將帶有篩選標(biāo)記和目標(biāo)DNA的序列轉(zhuǎn)化進(jìn)入目的絲狀真菌原生質(zhì)體基因組中；所述篩選標(biāo)記為選擇性標(biāo)記基因或者帶有營(yíng)養(yǎng)缺陷型基因； （2）轉(zhuǎn)化后獲得的原生質(zhì)體在含相應(yīng)于所述選擇性標(biāo)記基因的選擇性物質(zhì)的培養(yǎng)液中進(jìn)行再生和萌發(fā)培養(yǎng)，所述再生和萌發(fā)培養(yǎng)是指培養(yǎng)8-16小時(shí)，獲得用于后續(xù)篩選的短菌絲形態(tài)的轉(zhuǎn)化子，且所述短菌絲形態(tài)是指不超過(guò)70μm的短菌絲體； （3）利用流式細(xì)胞儀檢測(cè)步驟（2）獲得的轉(zhuǎn)化子直接分選至深孔板中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，所述深孔板是具有高通量篩選作用的培養(yǎng)器皿； （4）分析檢測(cè)步驟（3）中分選到深孔板發(fā)酵培養(yǎng)的轉(zhuǎn)化子，離心后取出深孔板中上清液進(jìn)行蛋白測(cè)定，比較分泌目標(biāo)蛋白的相對(duì)高低，得到基因工程成功改造的突變菌株； 所述絲狀真菌是嗜熱毀絲霉或黑曲霉。

如需購(gòu)買、轉(zhuǎn)讓、實(shí)施、許可或投資類似專利技術(shù)，可聯(lián)系本專利的申請(qǐng)人或?qū)＠麢?quán)人中國(guó)科學(xué)院天津工業(yè)生物技術(shù)研究所，其通訊地址為：300308 天津市濱海新區(qū)空港經(jīng)濟(jì)區(qū)西七道32號(hào)；或者聯(lián)系龍圖騰網(wǎng)官方客服，聯(lián)系龍圖騰網(wǎng)可撥打電話0551-65771310或微信搜索“龍圖騰網(wǎng)”。