杭州海關技術中心;浙江省檢驗檢疫科學技術研究院帥江冰獲國家專利權
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龍圖騰網獲悉杭州海關技術中心;浙江省檢驗檢疫科學技術研究院申請的專利一種豬腹瀉病原體多重核酸質譜檢測的引物和探針組、試劑盒和應用獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN120174154B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-08-19發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202510637444.4,技術領域涉及:C12Q1/70;該發明授權一種豬腹瀉病原體多重核酸質譜檢測的引物和探針組、試劑盒和應用是由帥江冰;張曉峰;韓笑;孔朋莉;金晨晨設計研發完成,并于2025-05-19向國家知識產權局提交的專利申請。
本一種豬腹瀉病原體多重核酸質譜檢測的引物和探針組、試劑盒和應用在說明書摘要公布了:本發明涉及分子生物學檢測技術領域,尤其涉及一種豬腹瀉病原體多重核酸質譜檢測的引物和探針組、試劑盒和應用。本發明采用基質輔助激光解吸電離飛行時間核酸質譜技術,能夠同時快速、靈敏、特異地檢測PEDV、TGEV、PDCoV、PoRV、SADS?CoV、PBoV、HEV和沙門氏菌等8種主要病原體。通過設計特異性引物和未擴展探針,結合多重PCR擴增和質譜分析,本方法實現了高通量、多病原體的同時檢測。實驗結果表明,所述方法具有高靈敏度和高特異性,無假陽性反應,并在60次重復實驗中顯示出100%的重復性。與qPCR方法的比較顯示,檢測一致性高達96.2%。該方法具有操作簡便、檢測速度快、適應性強的優點,可廣泛應用于豬腹瀉病原體的高效監測,為豬疾病的早期診斷和防控提供了重要的技術支持。
本發明授權一種豬腹瀉病原體多重核酸質譜檢測的引物和探針組、試劑盒和應用在權利要求書中公布了:1.一種基于MALDI-TOFNAMS法豬腹瀉病原體多重檢測的PCR引物和探針組,豬腹瀉病原體為豬德爾塔冠狀病毒(PDCoV)、豬流行性腹瀉病毒(PEDV)、傳染性胃腸炎病毒(TGEV)、豬急性腹瀉綜合征冠狀病毒(SADS-CoV)、戊型肝炎病毒HEV、豬輪狀病毒PoRV、豬博卡病毒PBoV和沙門氏菌(Salmonella);其特征在于,PCR引物和探針如下所述: PDCoV:上游引物的核苷酸序列為catatcctgtggcggatttc,下游引物的核苷酸序列為cagtcgttaagcatggcaag,探針的核苷酸tacatgggcaagagc; PEDV:上游引物的核苷酸序列為aaataaccagggtcgtggag,下游引物的核苷酸序列為tcttggactggttacgagac,探針的核苷酸cattattattgcctcctc; TGEV:上游引物的核苷酸序列為tgtgatggagtatgggtatc,下游引物的核苷酸序列為cattgtattgggattatgc,探針的核苷酸gggaacggttaaacgtagt; SADS-CoV:上游引物的核苷酸序列為ggcttactctaaacccagtc,下游引物的核苷酸序列為ttgggaaactggagtagctg,探針的核苷酸acactggggcatcagcattt; HEV:上游引物的核苷酸序列為tggttggatgaatataggg,下游引物的核苷酸序列為agtgccggcggtggtttctg,探針的核苷酸gtggtttctggggtgac; PoRV:上游引物的核苷酸序列為gtcaatcagactctacaag,下游引物的核苷酸序列為ggtcacatcctctcacta,探針的核苷酸cccagttactctacgtagcg; PBoV-G1:上游引物的核苷酸序列為gtgtttggttgtttgtccc,下游引物的核苷酸序列為gacacagtatggcaataccc,探針的核苷酸gggacccaatgcaagcatgga; PBoV-G2:上游引物的核苷酸序列為aaaagccacgctcatgcag,下游引物的核苷酸序列為ggtaacgccaaacgtgtttc,探針的核苷酸tgtttcccatcggta; PBoV-G3:上游引物的核苷酸序列為cccaacagttttcctctagc,下游引物的核苷酸序列為agtagtgtgaggcaggtaac,探針的核苷酸ccacaaggtccttgagcg; Salmonella:上游引物的核苷酸序列為tagaacgaccccataaacac,下游引物的核苷酸序列為tccattacctacctatctgg,探針的核苷酸acctatctggttgatt。
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