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      山東理工大學(xué)牛學(xué)良獲國(guó)家專利權(quán)

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      龍圖騰網(wǎng)獲悉山東理工大學(xué)申請(qǐng)的專利一種基于雙重信號(hào)放大策略靈敏檢測(cè)凝血酶的“三明治型”電化學(xué)適配體傳感器獲國(guó)家發(fā)明授權(quán)專利權(quán),本發(fā)明授權(quán)專利權(quán)由國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局授予,授權(quán)公告號(hào)為:CN116660344B

      龍圖騰網(wǎng)通過(guò)國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局官網(wǎng)在2025-08-15發(fā)布的發(fā)明授權(quán)授權(quán)公告中獲悉:該發(fā)明授權(quán)的專利申請(qǐng)?zhí)?專利號(hào)為:202310371361.6,技術(shù)領(lǐng)域涉及:G01N27/327;該發(fā)明授權(quán)一種基于雙重信號(hào)放大策略靈敏檢測(cè)凝血酶的“三明治型”電化學(xué)適配體傳感器是由牛學(xué)良;裴曉穎;杜世娜;張玉龍;黃艷設(shè)計(jì)研發(fā)完成,并于2023-04-10向國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局提交的專利申請(qǐng)。

      一種基于雙重信號(hào)放大策略靈敏檢測(cè)凝血酶的“三明治型”電化學(xué)適配體傳感器在說(shuō)明書摘要公布了:本發(fā)明提供了一種基于雙重信號(hào)放大策略靈敏檢測(cè)凝血酶的“三明治型”電化學(xué)適配體傳感器的構(gòu)建方法,步驟如下:步驟1、MoS2的制備,AuNPs的制備,AuNPs?MoS2復(fù)合材料的制備和TBA?2HeminG?quadruplexAuNPs?MoS2復(fù)合材料的制備,適配體傳感器的制備。2、AuNPs平均尺寸約為12–16nm的納米顆粒,具有較大的比表面積和良好的電催化性能。3、利用AuNPs?MoS2、HeminG?quadruplex對(duì)過(guò)氧化氫還原的優(yōu)異催化性能,實(shí)現(xiàn)檢測(cè)信號(hào)的雙重放大。4、利用凝血酶的兩種核酸適配體(TBA?1,TBA?2)作為識(shí)別原件,發(fā)明一種基于雙重信號(hào)放大策略靈敏檢測(cè)凝血酶的“三明治型”電化學(xué)適配體傳感器。

      本發(fā)明授權(quán)一種基于雙重信號(hào)放大策略靈敏檢測(cè)凝血酶的“三明治型”電化學(xué)適配體傳感器在權(quán)利要求書中公布了:1.一種基于雙重信號(hào)放大策略靈敏檢測(cè)凝血酶的“三明治型”電化學(xué)適配體傳感器,其特征在于:所述的傳感器的制備方法包括以下步驟: (1)MoS2的制備:MoS2的制備由水熱法獲得,取鉬源加入超純水中,室溫?cái)嚢瑁浑S后加入硫脲,室溫?cái)嚢瑁粚⑺萌芤恨D(zhuǎn)移到高溫反應(yīng)釜中反應(yīng);待反應(yīng)結(jié)束后,將反應(yīng)釜冷卻,將所得黑色溶液離心洗滌,用超純水和無(wú)水乙醇洗滌,真空干燥,得到花球形狀的MoS2,進(jìn)一步超聲操作,可得單層或少層MoS2; (2)AuNPs的制備:取超純水加入HAuCl4·4H2O,攪拌,加熱至沸騰,逐滴加入檸檬酸三鈉,繼續(xù)煮沸,冷卻攪拌至溶液到紅色,于深棕色玻璃瓶保存; (3)TBA-2HeminG-quadruplexAuNPs-MoS2復(fù)合材料的制備:取MoS2分散液超聲,加入AuNPs水溶液室溫震蕩,隨后用超純水離心洗滌,真空干燥,得到復(fù)合材料AuNPs-MoS2;將一定量的凝血酶適配體-2TBA-2加入到上述復(fù)合材料、震蕩,隨后加入血紅素Hemin、震蕩,形成HeminG-quadruple結(jié)構(gòu);加入牛血清白蛋白BSA,震蕩,離心洗滌;用Tris-HC1配成0.5-3.0mgmL的材料,保存使用; (4)適配體傳感器的構(gòu)建:用氧化鋁粉拋光玻碳電極GCE,用丙酮,乙醇,超純水,依次清洗,N2吹干待用;將工作電極在3mmolmL氯金酸水溶液中,于-0.2V電沉積,得到AuNPsGCE,取6μL4μmolmL凝血酶適配體-1TBA-1涂覆于電極表面,37℃孵育12h,隨后用2mmolL的巰基己醇MCH封閉活性位點(diǎn),得到TBA-1AuNPsGCE;進(jìn)而,在TBA-1AuNPsGCE上孵育不同濃度的TB,得到TBTBA-1AuNPsGCE;在TBTBA-1AuNPsGCE滴涂6~10μL的TBA-2HeminG-quadruplexAuNPs-MoS2,孵育1-3小時(shí),得到TBA-2HeminG-quadruplexAuNPs-MoS2TBTBA-1AuNPsGCE;其中,TBA-1序列為:5'-SH-CH26-GGTTGGTGTGGTTGGTT-3';TBA-2序列為:5'-SH-CH26-TTTGGGTAGGGCGGGTTGGGAACCTTCCTAGTCCGTGGTAGGGCAGGTTGGGGTGACT-3'。

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