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龍圖騰網(wǎng)獲悉江蘇眾紅生物工程創(chuàng)藥研究院有限公司;常州京森生物醫(yī)藥研究所有限公司申請(qǐng)的專利聚乙二醇化的門冬酰胺酶及其應(yīng)用獲國(guó)家發(fā)明授權(quán)專利權(quán)，本發(fā)明授權(quán)專利權(quán)由國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局授予，授權(quán)公告號(hào)為：CN105802946B 。

龍圖騰網(wǎng)通過國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局官網(wǎng)在2025-08-22發(fā)布的發(fā)明授權(quán)授權(quán)公告中獲悉：該發(fā)明授權(quán)的專利申請(qǐng)?zhí)?專利號(hào)為：201410837460.X，技術(shù)領(lǐng)域涉及：C12N9/82；該發(fā)明授權(quán)聚乙二醇化的門冬酰胺酶及其應(yīng)用是由馬永;王俊;吳鼎龍;聞興元;王和;徐春林;陳一飛;王耀方設(shè)計(jì)研發(fā)完成，并于2014-12-29向國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局提交的專利申請(qǐng)。

本聚乙二醇化的門冬酰胺酶及其應(yīng)用在說明書摘要公布了：本發(fā)明公開了一種聚乙二醇化的門冬酰胺酶及其在藥物制備中的應(yīng)用和臨床治療中的應(yīng)用。本發(fā)明PEG修飾的門冬酰胺酶中一分子門冬酰胺酶與13?45分子聚乙二醇偶聯(lián)，所述聚乙二醇為平均分子量2?20KDa的直鏈聚乙二醇本發(fā)明制備的PEG修飾后的門冬酰胺酶。本發(fā)明提供的聚乙二醇化的門冬酰胺酶，在具有降低免疫原性、半衰期明顯延長(zhǎng)等優(yōu)點(diǎn)的基礎(chǔ)上，聚乙二醇與門冬酰胺酶偶聯(lián)得更加穩(wěn)定，和市場(chǎng)上已銷售的PEG化門冬酰胺酶的原研藥和仿制藥產(chǎn)品相比，本發(fā)明提供的聚乙二醇化的門冬酰胺酶結(jié)構(gòu)更加穩(wěn)定、PEG結(jié)合牢固、不易脫落，且均一性、活性都更高。

本發(fā)明授權(quán)聚乙二醇化的門冬酰胺酶及其應(yīng)用在權(quán)利要求書中公布了：1.聚乙二醇化的門冬酰胺酶，其特征在于，平均一分子門冬酰胺酶與21.45分子聚乙二醇偶聯(lián)，所述聚乙二醇為平均分子量5KDa的直鏈聚乙二醇，所述聚乙二醇通過與門冬酰胺酶游離的氨基形成酰胺鍵或脲烷鍵來與門冬酰胺酶偶聯(lián)； 其結(jié)構(gòu)通式如下所示： 其中n＝2，m＝21.45，表示平均一分子門冬酰胺酶與21.45分子聚乙二醇偶聯(lián)；ASP是L-門冬酰胺酶；所述的聚乙二醇化的門冬酰胺酶，其由以下方法制備得到： 第一步：緩沖液置換 把門冬酰胺酶原料藥吸入Q離子交換柱上，上樣結(jié)束后用平衡緩沖液A液平衡色譜柱，平衡5個(gè)柱體積后用洗脫緩沖液B液進(jìn)行一步洗脫，收集洗脫峰；A液為20mM磷酸緩沖液，pH8.0；B液為20mM磷酸緩沖液，含0.2M氯化鈉，pH7.5； 第二步：修飾反應(yīng)及修飾產(chǎn)物純化 將第一步所收集洗脫峰的門冬酰胺酶溶液按門冬酰胺酶:PEG修飾劑為1:50的摩爾比進(jìn)行反應(yīng)，在4℃下反應(yīng)12h；其中PEG修飾反應(yīng)中門冬酰胺酶的蛋白濃度為5mgmL； 反應(yīng)結(jié)束后用離子交換色譜層析進(jìn)行純化，純化的色譜法條件：Q離子交換柱，平衡緩沖液C液：20mM的Tris-HCl，pH9.0，洗脫緩沖液D液：含0.1MNaCl的20mM的磷酸緩沖液，pH8.0，流速2.5mLmin，檢測(cè)波長(zhǎng)為280nm； 上樣：上述修飾反應(yīng)產(chǎn)物用0.5M的NaOH溶液調(diào)節(jié)至pH9.0，結(jié)合至Q離子交換柱； 平衡：C液沖洗5個(gè)柱體積； 洗脫：流動(dòng)相配比為0-50％D液，洗脫體積為10個(gè)柱體積，洗脫時(shí)間為20分鐘； 所述PEG修飾劑結(jié)構(gòu)通式如下： 其中n為2，mPEG的分子量為5000Da。

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